引言：國家藥監(jiān)局醫(yī)療器械注冊(cè)審評(píng)中心發(fā)布《定性檢測試劑性能評(píng)估注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原則（征求意見稿）》，向大眾公開征求意見，我們一起來看一下。

國家藥品監(jiān)督管理局

醫(yī)療器械技術(shù)審評(píng)中心
2019年9月25日

附件1

 定性檢測試劑性能評(píng)估注冊(cè)技術(shù)

審查指導(dǎo)原則

（征求意見稿）

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)醫(yī)療器械注冊(cè)申請(qǐng)人對(duì)定性檢測試劑性能評(píng)估注冊(cè)申報(bào)資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時(shí)也為技術(shù)審評(píng)部門審評(píng)注冊(cè)申報(bào)資料提供參考。

本指導(dǎo)原則是對(duì)定性檢測試劑性能評(píng)估的一般要求，申請(qǐng)人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對(duì)注冊(cè)申報(bào)資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。如申報(bào)產(chǎn)品已有適用的指導(dǎo)原則，具體性能研究建議參照其相應(yīng)的指導(dǎo)原則進(jìn)行。

本指導(dǎo)原則是供申請(qǐng)人和審查人員使用的指導(dǎo)性文件，但不包括注冊(cè)審批所涉及的行政事項(xiàng)，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，如果有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但需要提供詳細(xì)的研究資料和驗(yàn)證資料，相關(guān)人員應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時(shí)進(jìn)行調(diào)整。

一、適用范圍

本指導(dǎo)原則所述定性檢測試劑是指僅提供兩種檢測結(jié)果（即陽性/陰性或有/無）的體外診斷試劑。包括：無量值報(bào)告的檢測試劑和基于量值檢測后通過閾值判斷結(jié)果的檢測試劑。對(duì)于結(jié)果報(bào)告為陰性、1+、2+或3+的分等級(jí)報(bào)告或滴度的半定量檢測試劑，不適用于本指導(dǎo)原則。

本指導(dǎo)原則適用于基于所有方法學(xué)的定性檢測試劑，包括核酸擴(kuò)增技術(shù)、標(biāo)記免疫分析技術(shù)、免疫組織化學(xué)技術(shù)等。

本指導(dǎo)原則適用于所有預(yù)期用途的定性檢測試劑，包括：篩查試劑、診斷試劑和確認(rèn)/確證試劑。

本指導(dǎo)原則適用于進(jìn)行相關(guān)產(chǎn)品注冊(cè)和許可事項(xiàng)變更的性能評(píng)估，包括申報(bào)資料中的部分要求，其他未盡事宜，應(yīng)當(dāng)符合《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號(hào)，以下簡稱《辦法》）等相關(guān)法規(guī)要求。

二、技術(shù)審查要點(diǎn)

主要原材料和生產(chǎn)工藝經(jīng)過選擇和確認(rèn)后，在有效質(zhì)量管理體系下生產(chǎn)的質(zhì)量穩(wěn)定的體外診斷試劑產(chǎn)品，方可進(jìn)行性能評(píng)估，用于注冊(cè)申報(bào)。在注冊(cè)申報(bào)資料中，不得采用原材料研究階段和實(shí)驗(yàn)室研發(fā)階段生產(chǎn)的批次試劑進(jìn)行分析性能評(píng)估。

如試劑用于不同適用機(jī)型，需要在不同機(jī)型上分別進(jìn)行性能評(píng)估。但并不意味著，每個(gè)適用機(jī)型均采用相同的性能評(píng)估試驗(yàn)方案，對(duì)于某些性能，可采用主機(jī)型進(jìn)行充分的性能研究，其他機(jī)型采用驗(yàn)證的試驗(yàn)方案進(jìn)行，具體要求見（二）具體要求。但對(duì)于主機(jī)型的判斷，應(yīng)有充分依據(jù)。

如試劑包括不同包裝規(guī)格，需對(duì)不同包裝規(guī)格間的差異進(jìn)行分析或驗(yàn)證。如不同規(guī)格間存在性能差異，需采用每個(gè)包裝規(guī)格產(chǎn)品進(jìn)行性能評(píng)估；如不存在性能差異，需要詳細(xì)說明不同規(guī)格間的差別。

進(jìn)行分析性能評(píng)估所采用的樣本/樣本基質(zhì)應(yīng)盡量與預(yù)期適用的臨床真實(shí)樣本一致?？蔀轭A(yù)期人群樣本、樣本庫樣本、參考樣本（盤）、從類似病史患者獲取的混合樣本等。如無法獲得預(yù)期適用的樣本，應(yīng)說明原因?？墒褂孟♂尰蛘呓?jīng)處理去除分析物獲得低濃度樣本、添加分析物獲得高濃度樣本等人工制備的樣本。在采用人工制備樣本時(shí)，如需對(duì)臨床樣本進(jìn)行稀釋，可采用低濃度的臨床樣本或經(jīng)驗(yàn)證基質(zhì)效應(yīng)的稀釋液；如需對(duì)臨床樣本添加分析物，加入量應(yīng)盡可能少，原則上少于總體積的10%；如需對(duì)臨床樣本中添加干擾/交叉物質(zhì)，應(yīng)盡量使用接近體內(nèi)循環(huán)形式的樣品（加入體積不超過5%）或純品。如無法獲得真實(shí)樣本或真實(shí)樣本成分較復(fù)雜，存在大量干擾物（如痰液）時(shí)，可考慮使用標(biāo)準(zhǔn)菌（毒）株、臨床分離培養(yǎng)物。

用于性能研究的樣本，應(yīng)按照說明書聲稱的采集、保存、運(yùn)輸和處理方式進(jìn)行。同時(shí)應(yīng)考慮到不同樣本保存液、不同采樣器、不同處理方法（如核酸的提取與純化、抗原修復(fù)條件等）對(duì)檢測結(jié)果可能造成的影響。具體闡述不同影響因素之間的差別及可能產(chǎn)生的影響，并對(duì)可能產(chǎn)生影響的性能指標(biāo)進(jìn)行驗(yàn)證。

分析性能評(píng)估一般應(yīng)包括適用的樣本類型、準(zhǔn)確度、精密度、分析靈敏度，分析特異性、高劑量鉤狀效應(yīng)/前帶效應(yīng)、陽性判斷值、方法學(xué)比對(duì)等。以下主要針對(duì)定性試劑的上述共性項(xiàng)目進(jìn)行闡述。

1.適用的樣本類型

如果試劑適用于多種樣本類型，應(yīng)采用合理方法評(píng)價(jià)每個(gè)樣本類型的適用性。對(duì)于可比樣本，可采用同源比對(duì)的方法進(jìn)行驗(yàn)證；對(duì)于不可比樣本，應(yīng)對(duì)每個(gè)樣本類型分別進(jìn)行性能評(píng)估。如果樣本的采集、制備或處理方式存在差別，應(yīng)分析這些差別的潛在影響，并進(jìn)行針對(duì)性的性能驗(yàn)證

如試劑可用于不同適用機(jī)型，可分析各機(jī)型在適用樣本類型的差別，如無明顯差別，可僅采用一個(gè)主機(jī)型進(jìn)行適用的樣本類型的研究。

2.準(zhǔn)確度

申請(qǐng)人可選擇下述兩種方式進(jìn)行準(zhǔn)確度研究。

2.1方法學(xué)比對(duì)

方法學(xué)比對(duì)指采用與診斷準(zhǔn)確度標(biāo)準(zhǔn)或同類已上市產(chǎn)品，檢測同一套樣本的方式，比較檢測結(jié)果的差異。

樣本應(yīng)選擇預(yù)期人群的新鮮樣本，或參考樣本盤，并注意包含不同水平/型別待測靶物質(zhì)，且包含干擾及交叉樣本。此處所述參考樣本盤指，已經(jīng)診斷準(zhǔn)確度標(biāo)準(zhǔn)/其他成熟方法檢測確認(rèn)過的，或有準(zhǔn)確臨床診斷信息的，由多份臨床樣本組成的一套樣本。

2.2參考品（盤）的檢測

通過檢測參考品（盤）分析申報(bào)產(chǎn)品檢測結(jié)果與經(jīng)確認(rèn)結(jié)果的符合情況，評(píng)價(jià)申報(bào)產(chǎn)品的檢測準(zhǔn)確度。此處所述參考品（盤）指已經(jīng)診斷準(zhǔn)確度標(biāo)準(zhǔn)/其他成熟方法檢測確認(rèn)過的，或有準(zhǔn)確臨床診斷信息的，由多份樣本組成的一套樣本。參考品（盤）可以為商用來源，企業(yè)亦可自行建立。

應(yīng)注意參考品（盤）對(duì)各種常見型別/流行株的覆蓋和對(duì)所有檢測位點(diǎn)的覆蓋，包含不同來源、不同濃度水平的臨床樣本/臨床混合樣本和菌株/毒株。建議參考品（盤）還應(yīng)包含不含待測靶物質(zhì)的健康人樣本、干擾及交叉樣本等。對(duì)于臨床罕見樣本可采用細(xì)胞系或構(gòu)建樣本作為參考品（盤）的組成，但應(yīng)注意樣本基質(zhì)與臨床樣本的一致性?；蛱峤粯?gòu)建樣本與臨床真實(shí)樣本的一致性研究分析。

3.精密度

3.1 重復(fù)性、中間精密度和再現(xiàn)性

精密度研究應(yīng)考慮到運(yùn)行內(nèi)的變異和運(yùn)行間、日內(nèi)、日間、批次間、操作者間、儀器間和地點(diǎn)間的變異。一般而言，精密度包括重復(fù)性、中間精密度和再現(xiàn)性。重復(fù)性又稱批內(nèi)精密度，表示上述影響因素變化最小的情況（上述影響因素均不變），即相同操作者、相同試劑、相同操作條件、相同設(shè)備、相同地點(diǎn)，并在短時(shí)間段內(nèi)完成檢測。

再現(xiàn)性又稱實(shí)驗(yàn)室間精密度，表示上述影響因素變化最大的情況，即不同地點(diǎn)、不同操作者、不同設(shè)備。

重復(fù)性和再現(xiàn)性是精密度的兩種極端情形，在這兩種極端情形之間的精密度，稱為中間精密度（相同地點(diǎn)、不同時(shí)間、其他影響因素亦可發(fā)生變化），日間精密度，設(shè)備內(nèi)精密度、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)精密度均屬于中間精密度。

應(yīng)選擇包括弱陽性和陰性的至少兩個(gè)分析物濃度水平樣本進(jìn)行精密度研究。在每個(gè)適用機(jī)型上進(jìn)行重復(fù)性、日間精密度和批間差的研究，同時(shí)根據(jù)影響因素的重要性分析，采用主機(jī)型進(jìn)行中間精密度和/或再現(xiàn)性研究。

建議選擇典型或臨床常見型別樣本進(jìn)行精密度研究。對(duì)于多項(xiàng)聯(lián)檢試劑產(chǎn)品，尤其是核酸和染色體檢測試劑，一般可根據(jù)產(chǎn)品設(shè)計(jì)原理，每一反應(yīng)體系選擇易錯(cuò)或代表性樣本進(jìn)行研究。應(yīng)闡述研究位點(diǎn)選擇依據(jù)，明確樣本的來源、濃度和性質(zhì)確定方法。

3.2臨界值水平的精密度研究

除上述精密度研究外，建議申請(qǐng)人對(duì)申報(bào)產(chǎn)品的臨界值進(jìn)行確定（如適用），并采用該濃度/水平樣本進(jìn)行精密度研究。此處所述臨界值水平不同于通過ROC曲線等方法確定的陽性判斷值。理想情況下，臨界值濃度水平，即為多次重復(fù)試驗(yàn)時(shí)，50%的結(jié)果為陰性，50%的結(jié)果為陽性濃度水平，在本文以C₅₀表示。

建議采用C₅～C₉₅區(qū)間描述分析物濃度接近C₅₀的樣本重復(fù)檢測的不精密度。

首先建立C₅₀濃度，并通過對(duì)該濃度水平樣本進(jìn)行多次重復(fù)檢測，以對(duì)C₅₀濃度進(jìn)行確認(rèn)。而后以各濃度水平樣本進(jìn)行多次重復(fù)檢測的方式，判斷某一特定可接受范圍，如C₅₀±20%，是否包含了C₅～C₉₅區(qū)間。如果-20%至+ 20%的濃度范圍包含了C₅～C₉₅區(qū)間，則可以認(rèn)為距離C₅₀點(diǎn)達(dá)20%或以上的樣本可產(chǎn)生一致的結(jié)果; 即在C₅～C₉₅以外的樣本的結(jié)果是精密的，此時(shí)試劑精密度可接受。申請(qǐng)人可結(jié)合產(chǎn)品的特點(diǎn)，設(shè)置合理的結(jié)果接受標(biāo)準(zhǔn)，并詳述設(shè)定依據(jù)。對(duì)于可給出量值數(shù)據(jù)的定性檢測試劑，如OD值、Ct值，一般可依據(jù)產(chǎn)品的臨床預(yù)期用途、方法學(xué)自身的準(zhǔn)確度、生物學(xué)變異、靶物質(zhì)的特性等設(shè)定產(chǎn)品的精密度可接受范圍。

申請(qǐng)人可結(jié)合產(chǎn)品的特點(diǎn)，設(shè)置合理的（單側(cè)或雙側(cè)）置信度水平，采用合理的統(tǒng)計(jì)方法對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。推薦對(duì)C₅₀±20%兩個(gè)濃度水平分別重復(fù)進(jìn)行40次檢測，當(dāng)+20%濃度水平全部為陽性，-20%濃度水平全部為陰性時(shí)，得出-20%到+ 20%濃度范圍包含C₅～C₉₅區(qū)間的置信度＞80%。

4.分析靈敏度

4.1 檢出限

一般采用檢出限（LOD）指標(biāo)來體現(xiàn)申報(bào)試劑的分析靈敏度。檢出限的驗(yàn)證試驗(yàn)，應(yīng)采用不少于三批試劑進(jìn)行，且研究應(yīng)持續(xù)多天。如果試劑具有多個(gè)適用機(jī)型，應(yīng)至少對(duì)主機(jī)型進(jìn)行LOD的建立和驗(yàn)證，對(duì)其他適用機(jī)型，可僅進(jìn)行LOD的驗(yàn)證。

可給出連續(xù)量值信號(hào)的定性檢測試劑，如基于酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)的檢測試劑采用吸光度響應(yīng)區(qū)別“陽性”和“陰性”結(jié)果。對(duì)于此類檢測的檢出限設(shè)置，可參考《定量檢測試劑性能評(píng)估注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原則》中相關(guān)內(nèi)容，設(shè)定空白限和LOD。注意：這不適用于臨界值遠(yuǎn)高于檢出限的檢出項(xiàng)目。

4.1.1LOD的建立

建議采用對(duì)已知待測物濃度的樣本進(jìn)行系列稀釋后重復(fù)檢測的方法，確定申報(bào)試劑的檢出限。在上述重復(fù)檢測過程中，記錄不同稀釋度/濃度檢出（或陽性）的結(jié)果。采用適當(dāng)?shù)幕貧w模型（如Probit分析）和各待測物濃度進(jìn)行擬合，計(jì)算申報(bào)試劑在設(shè)定概率下的檢出限，一般在該檢測濃度下應(yīng)具有95%的可能性檢出。

對(duì)于染色體檢測試劑，需要考慮不同嵌合比例的檢出情況（如適用）。

對(duì)于線粒體突變檢測試劑和腫瘤基因突變檢測試劑，應(yīng)考慮特定核酸濃度下，不同突變比例的檢出情況下的LOD（如適用）。

對(duì)于病原體檢測試劑，評(píng)價(jià)時(shí)應(yīng)納入代表型別，分別計(jì)算每個(gè)型別的LoD，并取最大值作為整個(gè)檢測試劑的LOD。對(duì)于罕見的型別，應(yīng)在后續(xù)的檢出限驗(yàn)證試驗(yàn)中進(jìn)行確認(rèn)。

人類基因突變（胚系突變）或基因多態(tài)性檢測試劑，應(yīng)包含對(duì)型別為雜合子的樣本進(jìn)行LOD（核酸濃度）研究。

4.1.2 LOD的驗(yàn)證

申報(bào)試劑應(yīng)在檢測限濃度水平對(duì)常見分析物型別進(jìn)行驗(yàn)證，一般采用對(duì)檢出限濃度水平樣本進(jìn)行至少20次的重復(fù)試驗(yàn)的方法對(duì)檢出限進(jìn)行驗(yàn)證。申請(qǐng)人應(yīng)能夠提供用于檢出限驗(yàn)證的各個(gè)樣本的來源、型別及濃度確認(rèn)方法信息。

4.2 包容性（Inclusivity）

對(duì)于病原體檢測試劑和部分人基因檢測試劑，應(yīng)證明申報(bào)試劑具有檢出不同型別待測病原體/不同基因型的能力。包括已知型別（中國人群）、病原體的亞群（組）和血清型。應(yīng)采用略高于檢出限濃度的各型別樣本進(jìn)行研究。該樣本可以為滅活的臨床樣本或標(biāo)準(zhǔn)菌株/毒株。對(duì)于罕見的型別可根據(jù)推薦度依次選用：假病毒（病原體檢測適用）、細(xì)胞株（人基因檢測適用）>人工克隆或合成的DNA或RNA。應(yīng)提供各個(gè)研究樣本的來源、性質(zhì)確定方法及濃度等信息。

5. 分析特異性

5.1干擾試驗(yàn)

申請(qǐng)人應(yīng)分析樣本本身和樣本使用過程中潛在的干擾物質(zhì)，確定干擾物濃度/水平和干擾試驗(yàn)的接受標(biāo)準(zhǔn)，采用配對(duì)比對(duì)等方式進(jìn)行干擾試驗(yàn)研究。

5.1.1常見干擾物質(zhì)

樣本中包含的內(nèi)源性和外源性干擾物質(zhì)：如病理狀態(tài)下的人體代謝產(chǎn)物和異常升高物質(zhì)（如膽紅素、免疫球蛋白、脂蛋白、細(xì)胞因子、自身抗體）、生理?xiàng)l件變化下尿液的不同pH值、藥物及其代謝產(chǎn)物、人體常見攝入物質(zhì)（如飲料、營養(yǎng)補(bǔ)充劑、食物）、采樣部位常見物質(zhì)（如漱口水）等。

樣本采集和處理過程中引入的干擾物質(zhì)：如紅細(xì)胞裂解產(chǎn)生血紅蛋白、白細(xì)胞裂解產(chǎn)生的鉀離子、樣本添加劑如抗凝劑和防腐劑等。

另外，依據(jù)產(chǎn)品預(yù)期人群，應(yīng)考慮不同人群可能對(duì)檢測結(jié)果產(chǎn)生的影響，一般包括嬰幼兒、孕婦、腫瘤患者、血液疾病患者。

5.1.2干擾試驗(yàn)方法

一般可采用配對(duì)比對(duì)的方式，比較干擾樣本和不包含或含正常濃度水平干擾物樣本檢測結(jié)果間差異。如果差異超出接受范圍，應(yīng)進(jìn)一步研究該干擾物質(zhì)的濃度水平。

干擾樣本可選擇臨床真實(shí)樣本或采用人工添加高濃度干擾物的形式制備。干擾物終濃度應(yīng)選擇臨床可預(yù)期最高濃度（“最差條件”）。

建議采用包含弱陽性樣本在內(nèi)的至少兩個(gè)靶物質(zhì)濃度水平的樣本進(jìn)行干擾研究。

申請(qǐng)人可結(jié)合產(chǎn)品的特點(diǎn)，設(shè)置合理的結(jié)果接受標(biāo)準(zhǔn)，并詳述設(shè)定依據(jù)。對(duì)于可給出量值數(shù)據(jù)或計(jì)數(shù)結(jié)果的定性檢測試劑，如OD值、Ct值，一般可依據(jù)產(chǎn)品預(yù)期用途、生物學(xué)變異等設(shè)定產(chǎn)品的可接受范圍。

5.2交叉反應(yīng)研究

5.2.1常見交叉反應(yīng)物質(zhì)

一般包括分析物的結(jié)構(gòu)類似物、具有同源性序列的核酸片段、檢測范圍外的型別；易引起相同或相似的臨床癥狀的其他病原體、相同或相似的臨床癥狀出現(xiàn)時(shí)，體內(nèi)易升高的其他蛋白；采樣部位正常寄生或易并發(fā)的其他微生物，包含近緣微生物。

還應(yīng)考慮到由于產(chǎn)品原材料設(shè)計(jì)可能引入的交叉反應(yīng)。如病原體抗體檢測試劑采用基因重組抗原，應(yīng)增加對(duì)異源物質(zhì)如重組基因及表達(dá)宿主的特異性抗體的交叉反應(yīng)評(píng)價(jià)；如采用小鼠源性單克隆抗體作為主要原材料，應(yīng)注意HAMA可能對(duì)檢測造成的影響。

5.2.2研究方法

建議選擇高濃度交叉反應(yīng)物水平進(jìn)行驗(yàn)證，細(xì)菌或者真菌的最低濃度為10⁶ CFU/mL；病毒的最低濃度為10⁵PFU/mL；人野生型DNA至少包含1000 ng/μL野生核酸樣本。應(yīng)提供用于交叉反應(yīng)驗(yàn)證的病原體的制備方法、來源、種屬和濃度信息；應(yīng)提供所有基因型序列的來源、序列和濃度信息。

對(duì)于核酸檢測試劑，當(dāng)遇交叉反應(yīng)物難以獲得，如病原體難以培養(yǎng)或基因型頻率低時(shí)，可采用核酸樣本進(jìn)行交叉反應(yīng)的驗(yàn)證。此時(shí)應(yīng)將核酸樣本視為實(shí)際使用過程中參與檢測反應(yīng)的核酸樣本，根據(jù)說明書的要求配制反應(yīng)體系，進(jìn)行檢測。

對(duì)于血清學(xué)檢測試劑，用于交叉反應(yīng)研究的抗體類型應(yīng)與待測目的的抗體類型相同，如檢測病原病原體特異性IgG抗體，應(yīng)研究與其他相關(guān)病原體特異性IgG抗體的交叉反應(yīng)。

6.高劑量鉤狀效應(yīng)

對(duì)于部分免疫學(xué)的產(chǎn)品，含有極高濃度的待測抗體/抗原檢測時(shí)，飽和反應(yīng)可能導(dǎo)致檢測濃度值低于真實(shí)值或出現(xiàn)假陰性結(jié)果。此時(shí)應(yīng)評(píng)估是否存在鉤狀效應(yīng)及其影響。

建議對(duì)含有高濃度或滴度分析物的樣本進(jìn)行梯度稀釋后由低濃度至高濃度，每個(gè)梯度的稀釋液重復(fù)多份檢測進(jìn)行驗(yàn)證，并明確不產(chǎn)生高劑量鉤狀效應(yīng)/前帶效應(yīng)的最高濃度或滴度。

7.陽性判斷值

申請(qǐng)人應(yīng)當(dāng)詳細(xì)說明陽性判斷值確定的方法或依據(jù)，采用樣本的來源與組成，確定臨床診斷信息的方法并提交陽性判斷值建立的研究資料。

建議使用具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義數(shù)量的受試者樣本，樣本為包含一定比例的陰、陽性樣本的有代表性的目標(biāo)人群樣本，應(yīng)充分考慮到地域性、季節(jié)、不同感染階段/腫瘤分期和生理狀態(tài)等的影響因素。推薦采用受試者工作特征曲線（ROC）的方法確定陽性判斷值。此方法適用于可給出量值/信號(hào)值或計(jì)數(shù)值的定性檢測試劑?？墒褂门R床診斷信息進(jìn)行陰陽性判定，但注意此臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)必須可靠。如實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析存在灰區(qū)，應(yīng)明確灰區(qū)建立的基礎(chǔ)。

8.方法學(xué)比對(duì)

對(duì)于免于進(jìn)行臨床試驗(yàn)的體外診斷試劑，申請(qǐng)人還應(yīng)按照《免于進(jìn)行臨床評(píng)價(jià)的體外診斷試劑方法學(xué)比對(duì)技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求進(jìn)行方法學(xué)比對(duì)評(píng)估并提交研究資料。

對(duì)于預(yù)期用途為病原體感染輔助診斷的檢測試劑，建議額外采用轉(zhuǎn)換盤進(jìn)行診斷靈敏度的研究。

9.其他

9.1核酸提取

對(duì)于核酸檢測試劑，不同的核酸提取方法直接影響待測核酸的質(zhì)量與濃度水平，因此，此類試劑應(yīng)進(jìn)行核酸提取性能研究。申請(qǐng)人可通過對(duì)比不同提取方法的提取效率、提取重復(fù)性和抗干擾能力，選擇申報(bào)產(chǎn)品配套使用的核酸提取方法/試劑。

若申報(bào)試劑聲稱適用兩種或以上核酸提取方法/試劑，則應(yīng)對(duì)選定的每一種核酸提取方法/試劑性能進(jìn)行驗(yàn)證，一般而應(yīng)，應(yīng)至少包含對(duì)LoD和精密度的驗(yàn)證，此處精密度應(yīng)參考本文此前關(guān)于再現(xiàn)性的研究要求。

9.2免疫反應(yīng)性

對(duì)于免疫組織化學(xué)抗體試劑及檢測試劑，應(yīng)提交一批試劑對(duì)正常人體組織和非正常組織，每種組織類型不少于3例的免疫反應(yīng)性研究。評(píng)價(jià)陰/陽性表達(dá)情況并描述著色位置及染色特點(diǎn)。一般而言，非正常組織包括：相關(guān)良性、惡性病變組織和經(jīng)文獻(xiàn)報(bào)道可能出現(xiàn)陽性表達(dá)的惡性病變組織。

9.3基于原位雜交方法的檢測試劑的其他性能評(píng)估

此類試劑，常需進(jìn)行雜交效率以及探針特異性的研究。

雜交效率用于評(píng)價(jià)試劑中探針結(jié)合靶序列的能力。該研究建議使用中期分裂相的外周血淋巴細(xì)胞進(jìn)行涂片分析。雜交效率的研究應(yīng)考慮不同判讀者差異的影響。對(duì)于檢測特定腫瘤細(xì)胞中目標(biāo)序列的檢測試劑，還應(yīng)選擇相關(guān)腫瘤組織樣本進(jìn)行雜交效率的研究。

探針特異性通過特異雜交到染色體正確位置的雜交信號(hào)占全部雜交信號(hào)的比例來表示。該研究建議使用中期分裂相的外周血淋巴細(xì)胞涂片分析，選擇來源于不同人體的細(xì)胞，對(duì)至少200個(gè)靶位點(diǎn)進(jìn)行分析計(jì)數(shù)，研究應(yīng)結(jié)合顯帶技術(shù)進(jìn)行觀察。同時(shí)如果研究出現(xiàn)交叉雜交，應(yīng)考慮靶序列與交叉雜交序列的同源性程度，是否存在其他相似染色體異常類型等問題。

建議該類產(chǎn)品分析性能評(píng)估參照相應(yīng)的審查指導(dǎo)原則進(jìn)行。

一般應(yīng)有研究方案和研究報(bào)告，清晰描述研究目的，試驗(yàn)地點(diǎn)和方法，試驗(yàn)采用的具體試劑名稱、規(guī)格和批次，儀器名稱和型號(hào)，樣本類型、來源、處理方法、基質(zhì)類型及背景信息等，體現(xiàn)結(jié)果數(shù)據(jù)和數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析過程及結(jié)果。

分析性能評(píng)估的結(jié)果應(yīng)在產(chǎn)品說明書中進(jìn)行描述，合理聲稱產(chǎn)品性能。

1. 準(zhǔn)確度：被分析物質(zhì)的測定結(jié)果與真實(shí)結(jié)果之間的接近程度。

2. 陽性判斷值：又稱臨界值，用于鑒別樣品，作為判斷特定疾病、狀態(tài)或被測量存在或不存在的界限的量值。對(duì)于定性試驗(yàn)，高于此閾值的結(jié)果報(bào)告為陽性，而低于此閾值的結(jié)果報(bào)告為陰性。

3. C₅₀（50%濃度）:接近臨界值的分析物濃度，多次重復(fù)檢測此濃度的單一樣本時(shí)將獲得50%的陽性結(jié)果和50%的陰性結(jié)果。

4. C₅～C₉₅區(qū)間：臨界值附近的分析物濃度，可認(rèn)為此濃度區(qū)間之外的分析物檢測結(jié)果始終為陰性（濃度＜C₅）或始終為陽性（濃度＞C₉₅）

5. 診斷準(zhǔn)確度標(biāo)準(zhǔn)：使用一種方法或聯(lián)合多種方法，包括實(shí)驗(yàn)室檢測、影像學(xué)檢測、病理和隨訪信息在內(nèi)的臨床信息，來界定狀況、事件和關(guān)注特征有無的標(biāo)準(zhǔn)。

6. 檢出限（LOD）：由給定測量程序得到的測得量值，對(duì)于此值，在給定聲稱物質(zhì)中存在某成分的誤判概率為α?xí)r，聲稱不存在該成分的誤判概率為β。

注1:對(duì)于分子測量程序，指持續(xù)檢出的最低分析物濃度。（通常是指常規(guī)臨床實(shí)驗(yàn)室條件下，特定樣本類型>95%檢出率。）

7. 包容性（Inclusivity）：指檢測試劑可以對(duì)預(yù)期范圍內(nèi)的靶物質(zhì)檢出的能力。