2024年01月03日，為加強(qiáng)醫(yī)療器械注冊申報(bào)和技術(shù)審評指導(dǎo)，國家藥監(jiān)局器審中心組織制修定了《體外診斷試劑主要原材料研究注冊審查指導(dǎo)原則》，詳見正文。

體外診斷試劑主要原材料研究注冊審查指導(dǎo)原則

體外診斷試劑主要原材料是試劑的主要組成部分，是體外診斷試劑質(zhì)量水平的重要決定因素，影響著體外診斷試劑靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性等各項(xiàng)性能?？茖W(xué)合理地開展產(chǎn)品的主要原材料研究，確定原材料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，是產(chǎn)品設(shè)計(jì)開發(fā)的關(guān)鍵過程。本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對體外診斷試劑主要原材料進(jìn)行充分的研究，并整理形成注冊申報(bào)資料，同時(shí)也為技術(shù)審評部門審評注冊申報(bào)資料提供參考。

本指導(dǎo)原則是對體外診斷試劑主要原材料的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報(bào)資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。

本指導(dǎo)原則是供注冊申請人和技術(shù)審評人員使用的指導(dǎo)性文件，但不包括審評審批所涉及的行政事項(xiàng)，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。如果有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但是需要提供詳細(xì)的研究資料和驗(yàn)證資料。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時(shí)進(jìn)行調(diào)整。

一、適用范圍

體外診斷試劑的構(gòu)成中包括多種生物學(xué)和物理化學(xué)原材料，類型豐富，性能多樣，各種原材料共同決定了體外診斷試劑的質(zhì)量。其中部分原材料對于試劑性能至關(guān)重要，是反應(yīng)體系的主要構(gòu)成部分，具有生物活性或物理化學(xué)特性，生產(chǎn)工藝要求較高，需要嚴(yán)格的質(zhì)量控制，這些原材料被稱為體外診斷試劑的主要原材料，主要包括以下內(nèi)容：

（一）核心反應(yīng)體系原材料

1.與被測物直接反應(yīng)的生物活性材料

與被測物直接結(jié)合的抗原、抗體。

引物，探針，dNTP，DNA聚合酶、逆轉(zhuǎn)錄酶等直接參與核酸檢測反應(yīng)的酶。

生化檢測中與被測物反應(yīng)的底物、酶和輔酶等。

血型檢測用抗體、紅細(xì)胞，凝血檢測用血漿、激活劑等。

2.免疫競爭法原理試劑的被測物類似物

嗎啡-BSA結(jié)合物、甲基安非他明抗原，乙型肝炎病毒核心抗體等。

3.校準(zhǔn)品中的陽性材料

校準(zhǔn)品中含有的被測物材料，質(zhì)譜產(chǎn)品中的標(biāo)準(zhǔn)品等。

4.其他

刺激用病原體抗原，創(chuàng)新型原材料等。

（二）反應(yīng)體系中其他生物活性材料

1.與一抗試劑結(jié)合的二抗

免疫組化類產(chǎn)品的抗小鼠/兔IgG抗體等。

2.檢測信號產(chǎn)生所需的酶

免疫檢測類產(chǎn)品的辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶等。

3.針對性去除干擾相關(guān)的生物活性材料

抗紅細(xì)胞抗體、人抗鼠抗體（HAMA）阻斷劑、IgG抗體阻斷劑、抗生物素抗體、UDG酶，RNase抑制劑等。

背景信號封閉劑，例如封閉非特異擴(kuò)增的野生型引物，人 Cot-1 DNA。

4.起連接作用的生物活性材料

生物素和鏈霉親和素，熒光素和抗熒光素抗體等。

5.其他

蛋白酶K等。

（三）固相載體

1.免疫檢測用硝酸纖維素膜、磁微粒、微孔板等。

2.血型檢測用凝膠、玻璃珠

3.微流控載體

微流控芯片等。

（四）信號物質(zhì)

1.顯色、比濁物質(zhì)

膠體金、乳膠等。

2.發(fā)光物質(zhì)

熒光素/熒光微球/熒光染料、吖啶酯、三聯(lián)吡啶釕等。

3.凝集法檢測試劑用紅細(xì)胞（非血型檢測用）、明膠粒子

（五）質(zhì)控品和內(nèi)標(biāo)中的生物活性材料

1.含有特異性核酸片段的材料

含靶核酸片段、內(nèi)標(biāo)片段的基因組DNA、細(xì)胞、菌株、病毒、假病毒、質(zhì)粒等。

內(nèi)標(biāo)引物、探針。

2.含有抗原、抗體被測物的材料

天然/重組抗原、抗體，陽性樣本、動物血清、菌株、病毒等。

3.含有生化檢測被測物的材料

陽性血清、重組酶等。

4.免疫層析質(zhì)控線材料

膠體金法產(chǎn)品的質(zhì)控抗體等。

5.其他

陽性對照用刺激物，例如：植物血凝素。

備注1：如果原材料以包含核心反應(yīng)體系原材料的連接物、混合物等形式存在，則按照核心反應(yīng)體系原材料的要求提交適用的資料。

備注2：上述具體主要原材料僅為舉例，并非窮舉。體外診斷試劑的被測物和方法學(xué)較多，對于本文未涵蓋的原材料，請參照上述內(nèi)容進(jìn)行類型劃分。

《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報(bào)資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》中要求第三類體外診斷試劑注冊申報(bào)時(shí)需要提交主要原材料的研究資料，管理類別為第二類的產(chǎn)品注冊申報(bào)時(shí)無需提交主要原材料研究資料，由申請人保存，技術(shù)審評需要時(shí)提交。本指導(dǎo)原則主要針對第三類體外診斷試劑進(jìn)行闡述。

本指導(dǎo)原則主要描述體外診斷試劑主要原材料的通用要求，如申報(bào)產(chǎn)品已有針對性的具體指導(dǎo)原則，應(yīng)同時(shí)參照相應(yīng)產(chǎn)品的指導(dǎo)原則進(jìn)行。

本指導(dǎo)原則適用于體外診斷試劑，產(chǎn)品分類編碼為6840。

本指導(dǎo)原則適用于進(jìn)行相關(guān)產(chǎn)品注冊和變更注冊的主要原材料研究，包括申報(bào)資料中的部分要求，其他未盡事宜，應(yīng)當(dāng)符合《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》等相關(guān)法規(guī)的要求。

二、注冊審查要點(diǎn)

（一）主要原材料的選擇與來源

在產(chǎn)品設(shè)計(jì)開發(fā)的初期，需要根據(jù)產(chǎn)品的設(shè)計(jì)需求及性能指標(biāo)要求，結(jié)合原材料基本信息、參數(shù)指標(biāo)及供應(yīng)來源等因素綜合分析并驗(yàn)證，確定最適的原材料來源。

提交核心反應(yīng)體系原材料的選擇過程，包括理論分析和試驗(yàn)驗(yàn)證。理論分析是指從理論層面分析，為了實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品的靈敏度、特異性、包容性等性能，需要采用哪些抗原檢測病原體抗體，要針對哪個(gè)靶基因設(shè)計(jì)引物探針等，可對多個(gè)原材料進(jìn)行對比分析。試驗(yàn)驗(yàn)證一般是根據(jù)設(shè)計(jì)要求，對選擇的多個(gè)原材料進(jìn)行篩選試驗(yàn)，進(jìn)行原材料的最終選定。對于客觀上僅有單一來源的原材料，或者參考采用申請人已上市前代產(chǎn)品或同類產(chǎn)品的部分原材料的情況，可免于進(jìn)行篩選試驗(yàn)，直接對原材料進(jìn)行驗(yàn)證。

試驗(yàn)驗(yàn)證建議盡量全面，包括原材料指標(biāo)的驗(yàn)證（例如：濃度、純度、效價(jià)等）和功能性驗(yàn)證（例如：靈敏度、特異性、精密度、準(zhǔn)確度、線性、穩(wěn)定性等），具體驗(yàn)證內(nèi)容和方案由申請人根據(jù)產(chǎn)品適用性進(jìn)行確定。對于可能存在批間差異的原材料，建議采用多批原材料進(jìn)行驗(yàn)證，以篩選出批間一致性較好的原材料。在原材料選擇階段，建議針對影響試劑性能的原材料指標(biāo)進(jìn)行全面的試驗(yàn)驗(yàn)證。如果涉及不具備的儀器或操作方法，可以委托其他單位完成。對于功能性驗(yàn)證，需要采用多個(gè)具有代表性的真實(shí)樣本進(jìn)行試驗(yàn)，在此基礎(chǔ)上，對于部分罕見樣本，可采用培養(yǎng)物、細(xì)胞系等模擬樣本。

對于除核心反應(yīng)體系原材料之外的其他主要原材料，可免于提交選擇過程，直接提交選擇后的驗(yàn)證資料。

明確最終選定原材料的名稱、來源（申請人自制/外購及生產(chǎn)商名稱）和基本信息（例如：生物學(xué)來源，單克隆/多克隆，單克隆抗體克隆號/多克隆抗體免疫刺激原，天然抗原/重組抗原及表達(dá)載體，擴(kuò)增基因座位/位點(diǎn)名稱,片段大小，序列信息，制備及鑒定方法、過程等）。如果源于外購，還需要提交原材料生產(chǎn)商出具的質(zhì)量分析證書（COA）。針對引物、探針等自行設(shè)計(jì)，并委托其他生產(chǎn)商合成的原材料，需提供自行設(shè)計(jì)的相關(guān)資料和生產(chǎn)商出具的COA。

如果上述內(nèi)容涉及原材料生產(chǎn)商的技術(shù)保密資料，鼓勵(lì)申請人協(xié)助原材料生產(chǎn)商按要求進(jìn)行主文檔登記。

（二）主要原材料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

在主要原材料的選擇、驗(yàn)證基礎(chǔ)上，明確原材料的主要指標(biāo)，并考慮試驗(yàn)方法的可行性，進(jìn)一步形成主要原材料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，作為原材料到貨后驗(yàn)收的依據(jù)。在制定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)時(shí)建議遵循以下幾點(diǎn)：

1.主要原材料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)包括客觀評價(jià)指標(biāo)和相應(yīng)的試驗(yàn)方法。

2.核心反應(yīng)體系原材料的客觀評價(jià)指標(biāo)應(yīng)至少包括原材料本身的主要指標(biāo)和功能性指標(biāo)。

3.不同種類的主要原材料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)差異較大，難以統(tǒng)一表述。需要申請人根據(jù)原材料及產(chǎn)品的特性，制定科學(xué)合理的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。例如，抗體的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)可包括外觀、蛋白濃度、純度、分子量、效價(jià)及功能性實(shí)驗(yàn)等；核酸檢測用酶的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)可包括酶活性（如DNA聚合或逆轉(zhuǎn)錄活性，內(nèi)切或外切酶活性），擴(kuò)增中的熱穩(wěn)定性要求（如94℃保溫1小時(shí)后仍保持50%活性），相關(guān)的功能單位指標(biāo)等；人源或其他生物源性原材料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)可包括濃度和生物安全性指標(biāo)。

提供申請人按照質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)對原材料進(jìn)行入廠檢驗(yàn)（外購）/放行檢驗(yàn)（自制）的報(bào)告。

（三）企業(yè)參考品

體外診斷試劑生產(chǎn)企業(yè)一般會建立一套內(nèi)部參考品，用于產(chǎn)品的設(shè)計(jì)開發(fā)及原材料與產(chǎn)品的質(zhì)量控制。根據(jù)產(chǎn)品的具體情況及評價(jià)需求設(shè)計(jì)企業(yè)參考品，可包括陽性參考品/準(zhǔn)確性參考品、陰性參考品/特異性參考品、檢出限參考品、重復(fù)性參考品、線性參考品等。在申報(bào)資料中提交企業(yè)參考品的研究資料，包括原料來源、組成、制備、陰陽性和/或量值確定等。

如果申請人未建立企業(yè)參考品，而是根據(jù)質(zhì)量管理體系采用其他方式進(jìn)行產(chǎn)品的設(shè)計(jì)開發(fā)及原材料、產(chǎn)品的質(zhì)量控制，需要詳細(xì)說明，并確保合理性。

（四）產(chǎn)品技術(shù)要求附錄中主要原材料的內(nèi)容

根據(jù)《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》的規(guī)定，第三類體外診斷試劑的產(chǎn)品技術(shù)要求中應(yīng)當(dāng)以附錄形式明確主要原材料。

對于核心反應(yīng)體系原材料，需明確名稱、來源（申請人自制/外購及生產(chǎn)商名稱）、基本信息（生物學(xué)來源，單克隆/多克隆，單克隆抗體克隆號，天然抗原/重組抗原及表達(dá)載體，擴(kuò)增基因名稱,片段大小等）和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

對于除核心反應(yīng)體系原材料之外的其他主要原材料，需明確名稱、基本信息和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

對于具有較高公共健康風(fēng)險(xiǎn)的產(chǎn)品，建議載明主要原材料的更多信息，具體請參考相關(guān)產(chǎn)品的指導(dǎo)原則。

如果產(chǎn)品技術(shù)要求性能指標(biāo)、檢驗(yàn)方法中涉及采用企業(yè)參考品進(jìn)行試驗(yàn)，則需將企業(yè)參考品的設(shè)置情況（組成、樣本類型、陰陽性、濃度要求等）在技術(shù)要求附錄主要原材料中簡述。

三、參考文獻(xiàn)

[1] 國家市場監(jiān)督管理總局.體外診斷試劑注冊與備案管理辦法:國家市場監(jiān)督管理總局令第48號[Z].

[2] 國家藥品監(jiān)督管理局.關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報(bào)資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告:國家藥品監(jiān)督管理局公告2021年第122號[Z].

[3] GB/T 29791.1-2013，體外診斷醫(yī)療器械制造商提供的信息（標(biāo)示）第1部分：術(shù)語、定義和通用要求[S].