引言：單純皰疹病毒（Herpes simplex virus ，HSV）是最早發(fā)現(xiàn)的人類皰疹病毒，也是人類病毒性疾病中最常見的病毒。HSV感染導(dǎo)致的單純皰疹是一種常見的傳染性皮膚病。從體外診斷試劑注冊視角，一起來看看什么是HSV。

一、單純皰疹病毒結(jié)構(gòu)

單純皰疹病毒（Herpes simplex virus ，HSV）是最早發(fā)現(xiàn)的人類皰疹病毒，也是人類病毒性疾病中最常見的病毒。HSV感染導(dǎo)致的單純皰疹是一種常見的傳染性皮膚病。

HSV屬于人類皰疹病毒科α 病毒亞科，為線性雙鏈DNA 病毒，有HSV-1和HSV-2兩種亞型。HSV病毒顆粒呈球形，由包膜，間層，核衣殼和核心構(gòu)成。包膜為類脂雙層膜，表面上有許多突起，含8種病毒糖蛋白（gB, gC, gD ,gE, gF, gG, gH, gI和gJ）；核衣殼為162個殼粒組成的對稱的二十面體；核心為病毒DNA分子及DNA蛋白；在包膜及衣殼間為間層，包含病毒編碼蛋白質(zhì)和復(fù)制啟動相關(guān)的酶，覆蓋在衣殼周圍。

二、單純皰疹病毒感染特征

HSV主要通過接觸感染，感染可表現(xiàn)為溶細(xì)胞裂解和潛伏感染，其在上皮細(xì)胞進(jìn)行裂解復(fù)制，在感覺神經(jīng)元中則進(jìn)入潛伏期，受到外界刺激時，病毒重新激活引起臨床癥狀，潛伏病毒還可以通過激活的方式重新進(jìn)入復(fù)制周期(Lei, Wang et al. 2020)，并回到外周組織導(dǎo)致感染復(fù)發(fā)。HSV-1主要引起面部及腰以上皮膚黏膜病變，主要潛伏在三叉神經(jīng)節(jié)；HSV-2主要引起生殖器及腰以下皮膚粘膜病變，主要潛伏在骶神經(jīng)節(jié)。這兩種病毒引起的疾病并沒有絕對的界限，比如HSV-1可引起的生殖器皰疹，HSV-2也可引發(fā)口腔及周圍感染。

三、單純皰疹病毒核酸檢測產(chǎn)品批準(zhǔn)情況

臨床可根據(jù)典型的臨床表現(xiàn)進(jìn)行診斷，而非典型病例可以借助病毒分離培養(yǎng)，抗體檢測，抗原檢測和核酸檢測等手段。其中病毒分離培養(yǎng)被廣泛當(dāng)作是金標(biāo)準(zhǔn)，但是由于細(xì)胞培養(yǎng)周期較長，程序較復(fù)雜，在臨床檢驗(yàn)工作中應(yīng)用受到限制；抗體檢測是臨床上常用來檢測HSV感染的手段，病原體特異性IgM抗體常提示早期感染，特異性IgG抗體在原發(fā)性感染和再次感染時都可檢出，且存在時間較長；抗原檢測操作簡便，但是對于低滴度樣本的敏感性差；而采用熒光探針聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Real-time PCR）或其他分子生物學(xué)方法核酸檢測技術(shù)，檢測待檢標(biāo)本中的HSV DNA，是目前檢測速度最快且敏感性最高的方法，可以從少量的標(biāo)本中檢測有無HSV DNA存在。

目前我國境內(nèi)已批準(zhǔn)多家單純皰疹病毒1型和2型檢測試劑盒，均采用熒光探針PCR方法，檢測靶標(biāo)為HSV DNA，檢測樣本類型主要為男性尿道拭子，女性宮頸拭子, 皰疹液等。臨床試驗(yàn)主要通過與已上市同類產(chǎn)品進(jìn)行對比研究，驗(yàn)證申報(bào)產(chǎn)品的臨床性能可以滿足相關(guān)要求，可用于單純皰疹病毒感染的輔助診斷。

FDA已批準(zhǔn)單純皰疹病毒1型和2型檢測試劑盒檢測靶標(biāo)為HSV DNA或mRNA，檢測樣本類型包括皮膚粘膜損傷，口腔部位損傷，生殖器損傷，腦脊液等。其中在2014年FDA批準(zhǔn)SIMPLEXA HSV 1&2 DIRECT用于懷疑中樞神經(jīng)系統(tǒng)HSV感染患者的腦脊液樣本的檢測。境外臨床試驗(yàn)主要通過與金標(biāo)準(zhǔn)病毒培養(yǎng)鑒定比較，或與測序比較，評價產(chǎn)品臨床性能，確認(rèn)產(chǎn)品是否可用于具有相關(guān)癥狀的患者。

四、對單純皰疹病毒核酸檢測產(chǎn)品的思考

對于產(chǎn)品適用人群的考慮：單純皰疹大多呈局部皮膚黏膜的皰疹糜爛性損害，全身癥狀一般較輕，但初發(fā)性皰疹往往全身癥狀較為明顯，如發(fā)熱，乏力，淋巴結(jié)觸痛等，HSV在各年齡階層人群普遍易感，女性患病率比男性高，兒童營養(yǎng)不良或各種原因引起的免疫力低下也容易受到感染。臨床試驗(yàn)應(yīng)納入具有相關(guān)臨床癥狀的人群，且入組人群應(yīng)有一定的代表性。

對于產(chǎn)品適用樣本類型的考慮：單純皰疹病毒感染可發(fā)生在多個部位，如口腔皰疹，皮膚皰疹，眼皰疹，生殖器皰疹，皰疹性腦炎，全身散播性皰疹感染，新生兒皰疹等。其起始感染部位是由患者感染病毒的途徑?jīng)Q定，而不是病毒的固有屬性，因此患者感染部位具有多樣性和復(fù)雜性，樣本之間具有差異性，申請人應(yīng)在產(chǎn)品設(shè)計(jì)階段需將產(chǎn)品檢測的樣本類型納入考慮，設(shè)計(jì)科學(xué)合理的臨床試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。

對于產(chǎn)品對比方法的考慮：如有已上市體外診斷試劑注冊同類產(chǎn)品，應(yīng)考慮預(yù)期用途，檢測靶標(biāo)，樣本類型，試劑性能等方面選擇合適的已上市同類產(chǎn)品作為對比試劑驗(yàn)證產(chǎn)品的臨床性能。對于不同樣本類型，如無已上市同類產(chǎn)品，可考慮使用病毒培養(yǎng)鑒定方法和測序方法作為對比方法，評價產(chǎn)品性能是否可以滿足臨床需求。